Гистологическая верификация что это

Что такое морфологическое подтверждение

В этом материале мы постараемся популярным языком, доступным не только онкологу или патологу, рассказать о верификации (подтверждении) онкологического диагноза с помощью гистологического и иммуногистохимического исследования.

Сначала разберемся с терминологией. Морфологическим исследованием в медицине называют исследование структуры тканей, выполненное различными способами.

· Первичная визуальная оценка врачом-патологом биопсийного материала, вырезка отдельных участков для проведения исследования

· Проводка материала (процесс специальной подготовки биопсийного материала, в результате которого получается гистологический (парафиновый) блок)

· Микротомирование (процесс обработки блока на микротоме и нарезки из него пластин биопсийного материала толщиной около 1 микрона)

· Окраска гистологических препаратов в процессоре (иммуногистостейнере)

· Микроскопия (изучение гистологических препаратов под электронным микроскопом)

Важно отметить, что врач-патоморфолог должен обладать энциклопедическими знаниями и большим опытом, основанном на объеме проведенных исследований и изучении опыта коллег.

Большую часть выше описанных процессов можно и нужно автоматизировать. Современная патоморфологическая лаборатория должна напоминать высокотехнологичное производство. Такой подход позволяет добиться не только высокой производительности работы лаборатории, но и повышения качества каждой технологической операции, а также страховки от человеческих ошибок.

Гистологическое исследование позволяет определить злокачественность или доброкачественность новообразования. Иммуногистохимическое исследование позволяет дифференцировать подвид опухоли и назначить правильное лечение. Успех химиотерапии, к примеру, напрямую зависит от качества проведения гистологических исследований.

Отдельно нужно сказать о пересмотре готовых гистологических препаратов(стекол). Эта практика является достаточно распространённой, но, к сожалению, не дающей гарантий консультацией. Дело в том, что врач-патоморфолог, оценивая готовое стекло, не может повлиять на процедуру приготовления этого стекла(достаточно сложную и высокотехнологичную, как было написано выше). Поэтому единственным способом гарантированной консультации гистологических препаратов на сегодняшний день является проведение повторного исследования на основе гистологических(парафиновых) блоков.

Резюмируя вышесказанное, можно отметить, что морфологическая верификация является важнейшим методом подтверждения онкологического диагноза и основой для назначения лечения. Без проведения гистологических(иммуногистохимических) исследований невозможно со 100% уверенностью ставить диагноз в подавляющем большинстве случаев. К сожалению, лабораторий, имеющих возможность проводить точную и срочную гистологическую диагностику, очень и очень мало. Сроки проведения иммуногистохимических исследований в среднем в России составляют 15-20 дней, что непозволительно долго. Для сравнения, автоматизированная лаборатория Unim проводит ИГХ-исследования в среднем за 3-4 дня.

Стоимость и срок исследования

* Организация и оплата доставки сырого материала (не в блоках) осуществляется клиентом.

По всем возникшим вопросам Вы можете проконсультироваться у нашего медицинского администратора по телефону: 8-800-555-92-67 или написать нам в WhatsApp: +7 925 740 05 87

Источник

Гистология

Гистологическая верификация опухолей различных локализаций: принципы гистологического исследования и его необходимость

В настоящий момент гистологическое исследование опухолей является одним из самых достоверных и важных диагностических методов. Гистологическое исследование проводят врачи-патологоанатомы (патоморфологи), оценивая на первом этапе методом световой микроскопии («под микроскопом») материал после биопсии (фрагмент непосредственно опухоли) или же операционный материал (удаленный орган или его часть). В дальнейшем, при необходимости, используются дополнительные методы исследования.

Данное исследование проводится как для выяснения гистогенеза («происхождения») новообразования, так и для оценки степени терапевтического патоморфоза («ответа опухоли на проведенную терапию»). Вероятность назначения неправильного лечения велика при отсутствии информации о том, что же из себя представляет обнаруженная опухоль. Нельзя ориентироваться лишь на клиническую картину или только на результаты методов визуализации (рентген, КТ, МРТ) или анализов крови. Лишь в отдельных случаях при повышении тех или иных показателей (например, альфа-фетопротеин) и характерной локализации (например, опухоль у маленького ребенка в крестцово-копчиковой области) химиотерапия может быть назначена без предварительного гистологического подтверждения. Но такие случаи редки. Зачастую ваш онколог не знает, с чем имеет дело и может лишь высказать свои предположения, поставив диагноз со знаком «?». Тогда и назначается биопсия с последующим морфологическим исследованием.

Морфологическое исследование является заключительным этапом в диагностическом поиске и позволяет онкологам безошибочно выбирать между тем или иным курсом химиотерапии, или же совсем от нее отказаться в случае получения заключения о доброкачественном процессе.

Практически у каждой опухоли имеется ряд характерных лишь для нее признаков, позволяющих морфологу выставить тот или иной диагноз. Одним из плюсов гистологического исследования является возможность оценить картину непосредственно пораженного органа, посмотреть на опухоль «изнутри».

Однако, опухоли различных локализаций имеют как свою характерную гистологическую картину, так и могут быть похожими друг на друга. Кроме того, визуально «одинаковые» опухоли могут иметь разное происхождение у пациентов различных возрастов и в разной локализации. Поэтому, когда пациент обращается в лабораторию патоморфологии со словами: ”Мне необходима независимая экспертиза, поэтому я вам не скажу ни возраст, ни локализацию!” – это неправильно, и такого быть не должно. В первую очередь, это касается опухолей костей и мягких тканей, а также опухолей головного и спинного мозга. В данных ситуациях предоставление патоморфологу рентгенограмм, КТ и МРТ просто необходимо. В остальных случаях наиболее полные клинические данные (анамнез, протокол операции и т.д.) помогут патоморфологу наметить себе путь для дальнейших диагностических поисков и для применения дополнительных методов (дополнительные гистохимические окраски, иммуногистохимическое исследование).

Кроме 100% точности диагноза, в отдельных случаях гистологическое исследование позволяет расширить или же, наоборот, ограничить объем хирургического вмешательства. Приведем несколько примеров.

Опухоль молочной железы. Первая мысль, которая возникает у женщины – рак! Да, это возможно, но… Существует ряд оговорок. После какого метода исследования был выставлен диагноз? Если это цитологическое исследование (мазки), то есть высокая вероятность ошибочно выставленного диагноза. Это обусловлено тем, что даже «нормальные» клетки эпителия после нанесения на стекло (грубо говоря «размазывания») могут принимать атипичный вид и вводить цитолога в заблуждение. В таком случае просто необходимо гистологическое исследование биоптата («кусочка опухоли») врачом-патологоанатомом, который достоверно выставит диагноз. Ведь вероятность того, что опухоль доброкачественная, также есть. В таком случае удалять всю молочную железу и калечить пациентку нет необходимости, а можно ограничиться лишь секторальной резекцией (удалить лишь пораженную часть железы). Или же в случае получения диагноза «лимфома» (такое тоже возможно), вообще не проводить оперативное вмешательство.

Поражение желудка. Опять же, есть вероятность того, что это рак. Но никто не исключал и лимфому. Тогда нет необходимости удалять желудок, а можно ограничиться лишь химиотерапией.

Все зависит, конечно, от качества материала, взятого для исследования и квалификации патоморфолога. Ни один диагноз опухоли, злокачественной или доброкачественной, не выставляется лишь одним врачом. В таких случаях принцип коллегиального просмотра очень важен. Минимум два мнения и четыре глаза. Ведь то, что видит один врач, может пропустить другой, или не обратить на это внимание.

Подводя резюме под вышесказанным, можно выделить несколько последовательных этапов до момента постановки правильного диагноза:

— обращение пациента к клиническому врачу/онкологу;

— полное и всестороннее обследование с выявлением опухолевого очага;

— биопсия/удаление образования с доставкой его в лабораторию патоморфологии для морфологической диагностики;

— вместе с материалом предоставляются как можно более полные клинические данные и результаты методов обследования.

Лишь совокупность материал+данные помогут патоморфологу в правильной постановке диагноза, а, следовательно, и онкологу в последующем правильном выборе того или иного метода лечения.

Как уже было сказано выше, финальной точкой в диагностическом поиске для клинических врачей является заключение патоморфолога. Однако в некоторых ситуациях и морфологическое исследование не придает 100% уверенности патологоанатому в том или ином диагнозе. Данная ситуация касается метастазов в лимфатические узлы из невыявленного первичного очага. Работа с таким материалом является в настоящее время одной из самых кропотливых и относительно долгой. Ведь в лабораторию попадает лишь ткань лимфатического узла (в некоторых случаях легкого, кости, печени и т.д.) и крайне скудные клинические данные: «Проведено обследование, первичный очаг не выявлен». В данной ситуации в первую очередь ориентиром для морфолога является локализация пораженного узла (шея, подмышечная или паховая область, тот или иной орган). На первом этапе это помогает сориентироваться в том, откуда этот метастаз, ведь морфолог знает пути метастазирования тех или иных опухолей, а также наиболее вероятные первичные локализации для данного процесса. Например, рак простаты – кости, остеосаркома – легкие и т.п. Зная, откуда был взят пораженный лимфатический узел, можно предположить локализацию опухоли, а, в дальнейшем, на помощь придет иммуногистохимическое исследование. В ряде случаев, все ограничивается гистологией («картиной под микроскопом») и двумя-тремя антителами. Однако, в ряде ситуаций и иммуногистохимическое исследование неоднозначно (выше мы упоминали о схожести и различиях тех или иных опухолей). Поэтому зачастую пациент получает заключение например «в большей степени вероятности метастаз рака щитовидной железы» или «в большей степени соответствует метастазу меланомы», а комментарием практически в 100% случаев будет являться «необходимо всестороннее дополнительное клиническое дообследование». И данный факт не означает и не указывает на некомпетентность того или иного морфолога. Это заключение дает ориентир клиническим врачам и онкологам в дальнейшем диагностическом поиске, что экономит время пациенту, ограничивая объем диагностически методов. Ни один уважающий себя патологоанатом не выставит диагноз лишь на основании своих ощущений, не имея при этом фактов в пользу той или иной опухоли. Поэтому, получив заключение с вышеуказанной формулировкой, не спешите обвинять морфологов в некомпетенции или клинических врачей в халатности и упущенных возможностях. Вам намечен путь для дальнейшего обследования, а это уже половина успеха.

Стоимость и срок исследования

* Организация и оплата доставки сырого материала (не в блоках) осуществляется клиентом.

По всем возникшим вопросам Вы можете проконсультироваться у нашего медицинского администратора по телефону: 8-800-555-92-67 или написать нам в WhatsApp: +7 925 740 05 87

Источник

Морфологические методы исследования

Морфологические методы исследования

Для чего необходимо морфологическое исследование опухолевой ткани?

Практически во всех случаях точный диагноз онкологического заболевания может быть установлен только на основании результатов исследования образца опухолевой ткани, полученной у пациента. Наиболее часто с этой целью используются следующие методы получения биологического материала:

​В большинстве случаев забор опухолевой ткани осуществляется с использованием того или иного метода обезболивания (анестезии).

Пункция

Во время пункции возможно получить небольшое количестве клеток для цитологического исследования. Во время выполнения этого вмешательства врач вводит в опухоль тонкую иглу и при помощи шприца забирает небольшое количество материала. После этого полученная ткань (жидкость и содержащиеся в ней клетки) помещается на специальное предметное стекло. Данный метод исследования называется цитологическое исследование (цитология), он дает возможность получить информацию об отдельных клетках, из которых состоит исследованная ткань. Пункция является наименее травматичным методом получения материала для исследования, однако его информативности в некоторых случаях может быть недостаточно. К примеру, отрицательные результаты пункции не всегда означают отсутствие опухолевого роста.

Для цитологического исследования также может быть использована слюна, мокрота, моча, жидкость, скопившаяся в брюшной или плевральной полости (асцит или плеврит), а также мазки или смывы из половых путей, дыхательных путей и т.д. Также используют отпечатки с патологических образований (язв, эрозий). В последнем случае предметное стекло прикладывается к интересующей зоне, после чего изготавливается материал, аналогичным образом может быть взят мазок-отпечаток при котором с патологического образования соскребается материал при помощи шпателя, скальпеля или других инструментов.

Биопсия

В отличие от пункции при проведении биопсии удается получить значительно большее количество опухолевой ткани, данный вид забора материала применяется для получения материала для гистологического исследования материала. В ходе его выполнения можно получить точную информацию о строении опухолевой ткани. В отличие от вышеописанного цитологического исследования результаты данного вида исследования отличаются большей точностью, кроме того, больший объем материала позволяет точнее установить диагноз (например, выявить точный подвид опухолевых клеток), и, в случае наличия необходимости, провести дополнительные иммуногистохимические методы обследования (подробнее описано ниже).

Несмотря на указанные преимущества, выполнение биопсии является более травматичной процедурой для организма, чем выполнение пункции. В некоторых случаях проведение данного исследования может быть невозможно вследствие наличия высокого риска травматического повреждения близко расположенных к опухоли сосудов, например, при опухолях расположенных в области поджелудочной железы, в связи с чем пункция может быть единственным доступным методом получения материала для исследования.

Виды биопсии

Биопсия может осуществляться как под контролем зрения врача («на ощупь») так и под контролем специального оборудования, например ультразвукового аппарата или компьютерной томографии. В наиболее сложных случаях, например, при биопсии новообразований, расположенных в головном мозге, используются специальные методы фиксации пациента, препятствующие смещению опухоли при заборе материала (стереотаксическая биопсия). Существуют следующие основные виды биопсии:

В зависимости от расположения опухоли биопсия может быть выполнена как снаружи через кожу, так и изнутри организма. С этой целью в организм могут вводиться эндоскоп, который представляет собой тонкую гибкую трубку, оснащенную видеокамерой и различными манипуляторами. При помощи эндоскопических методов может быть осуществлена биопсия новообразований, расположенных в просвете желудочно-кишечного тракта (гастроскопия и колоноскопия), например, полипов толстой кишки, бронхов (бронхоскопия), мочевыводящих путей (цистоскопия), грудной клетки (торакоскопия) и брюшной полости (лапароскопия).

Выполнение гистологического исследования

Гистологическому исследованию в обязательном порядке подвергается любой удаленный материал, в том числе – после хирургического удаления опухоли в ходе оперативного этапа лечения. Изучение послеоперационного материала позволяет уточнить диагноз, распространенность процесса и его стадию, оценить наличие вовлечения в болезнь лимфатических узлов и т.д.

После получения материала для исследования любым из вышеуказанных способов он отправляется на исследование к специалисту по морфологическому изучению опухолей – патологоанатому (или патоморфологу), который обрабатывает полученную ткань необходимым образом и проводит её исследование. Так как ткань опухоли подвержена естественным процессам разрушения, необработанный материал может стать непригодным для дальнейших исследований. В первую очередь с целью обеспечения сохранности ткани проводится её обработка специальным фиксирующим раствором, например формалином.

После этого ткань запечатывается в парафин (воскоподобный материал) в результате чего образец опухолевой ткани становится пригодным для исследования и хранения в течение длительного времени. Таким образом создаются так называемые «опухолевые блоки». Опухолевый блок – кусочек опухолевой ткани, запечатанный в парафин. Как правило, изготавливается множество блоков, содержащих разные участки опухолевой ткани.

После этого с части или со всех или с части изготовленных блоков делаются тонкие срезы, пригодные для исследования под световым микроскопом («опухолевые стекла»). Эти стекла врач-патоморфолог изучает под микроскопом, в некоторых случаях – после специальной окраски, которая позволяет лучше оценить те или иные детали строения опухоли. В ходе изучения опухолевой ткани врач старается установить наличие или отсутствие признаков злокачественности опухоли, степень её злокачественности, вид клеток, из которых она возникла и т.д.

Иногда, в тех случаях, когда необходимо получение максимально быстрого ответа вместо запечатывания опухолевой ткани в парафин, применяется её быстрая заморозка с последующей «нарезкой» и изучением под микроскопом. Этот процесс занимает около 15-20 минут. Данный метод применяется при необходимости интраоперационного исследования материала, когда непосредственно в процессе выполнения оперативного вмешательства хирургу необходимо получить гистологическую информацию, например, о наличии или отсутствии опухолевых клеток по краю резекции (отреза) для того, чтобы убедиться в радикальности выполненного вмешательства.

Результаты морфологического исследования

По результатам исследования врач-патоморфолог составляет цитологическое или гистологическое заключение, в котором отражаются результаты изучения образца опухолевой ткани под микроскопом, а также результаты гистохимических и молекулярных исследований, если они проводились. Как правило, гистологическое заключение может содержать следующую информацию:

Как правило, проведение гистологического исследования занимает до 10 дней. Обязательно сохраните у себя копию гистологического заключения, а также убедитесь в сохранности стекол и блоков

Дополнительные методы исследования

В ряде случаев для установления точного диагноза может понадобиться определение подвида опухоли, а также наличия в ней экспрессии (выработки) определенных белков, которые могут быть использованы в качестве «мишеней» для противоопухолевой терапии.

С этой целью врач-патоморфолог может дополнительно провести иммуногистохимическое исследование (ИГХ). Суть ИГХ исследования заключается в обработке опухолевой ткани специальными антителами, которые связываются со своими белками-мишенями на поверхности опухолевых клеток. После выполнения определенных процедур это приводит к тому, что эти белки становятся видны при микроскопическом исследовании опухоли, если они ей продуцируются.

Врач-патоморфолог может оценить «набор» белков, которые вырабатываются опухолью, а также степень экспрессии того или иного белка. ИГХ является незаменимым методом в следующих случаях:

ИГХ очень широко применяется при обследовании больных раком молочной железы. Всем пациенткам с этим диагноз проводится определение наличия в опухоли экспрессии рецепторов гормонов, эстрогена и прогестерона, а также скорости деления клеток (индекс Ki-67) и выраженности экспрессии белка HER2-neu. Это необходимо для того, чтобы понять, какие именно механизмы запускают процессы деления опухолевых клеток. Избирательно подавляя эти механизмы можно блокировать процессы роста и деления опухолевых клеток. Например, если установлено, что процессы роста опухолевых клеток стимулируют эстрогены и/или прогестерон, лишив злокачественные клетки «доступа» к ним можно добиться выраженного противоопухолевого эффекта.

Наличие в опухоли повышенной экспрессии белка HER2-neu ассоциировано с высокой её агрессивностью и быстрым ростом. Это требует применения специальных препаратов, избирательно воздействующих на этот сигнальный путь. Наиболее часто с этой целью применяется трастузумаб – моноклональное антитело, связывающее HER2-neu.

В отдельных случаях применяются дополнительные молекулярные методы изучения опухоли. В этом случае проводится дополнительное изучение генома злокачественных клеток. При некоторых заболеваниях это может дать ценную информацию для лечения. К молекулярным методам исследования относится флюоресцентная гибридизация in situ (FISH) и полимеразная цепная реакция (ПЦР). Эти методы исследования являются наиболее точными, но их проведение может потребовать дополнительного времени, кроме того они являются достаточно дорогостоящими.

Получение второго мнения

В некоторых случаях, особенно при лечении редкого заболевания, полезным может оказаться получение второго мнения (консультации другого специалиста) по результатам гистологического исследования. Для этого вам понадобиться получить изготовленные стекла и опухолевые блоки и предоставить их на консультацию в выбранное вами учреждение. Дополнительно следует предоставить актуальную выписку из вашей истории болезни и результаты предыдущих гистологических исследований, так как это может дать врачу ценную информацию.

Обратите внимание: проведение дополнительных исследований с целью получения второго мнения может быть платным.

Внимание! Информация в данном разделе не является заменой квалифицированного мнения врача, представлена исключительно в образовательных целях и не является руководством к действию.

Источник

Верификация опухоли – варианты и методы выявления рака

Важный этап диагностики рака – определение гистологического типа злокачественного новообразования. Верификация опухоли – это оценка морфологического (клеточно-тканевого) варианта карциномы, предполагающая проведение исследований с биопсийным материалом. Нельзя начинать лечение, не зная гистотип (тканевой состав) и клеточную дифференцировку раковой опухоли.

Выяснив клеточно-тканевой состав опухоли, можно начинать терапию

Верификация опухоли

До момента применения комбинированной терапии надо точно выяснить морфологическую структуру новообразования. Вражеская армия может состоять из агрессивных молодых и необученных бойцов, с которыми легко справится иммунная система. Или противоопухолевой защите придется столкнуться с живучим, хитрым и коварным противником, способным быстро изменяться и приспосабливаться.

Зная состав вражеского войска, можно предвидеть исход битвы.

Верификация опухоли – это микроскопическая оценка взятых при биопсии тканей, на основе которых врач-лаборант точно определит цитоморфологический состав злокачественного новообразования: важен не только факт обнаружения рака, но и гистологический вариант опухолевого роста с отличием от исходных здоровых клеток. Зная состав вражеского войска, можно предвидеть исход битвы.

Варианты биопсийного материала

Врач-лаборант, выполняющий морфологические исследования, будет работать со следующими видами биопсийного материала:

Любая ткань может стать основой для проведения качественной морфологической диагностики, но при одном важном условии – во время выполнения биопсии опухоли надо взять неповрежденный участок из карциномы. Чем сохраннее биоптат, тем качественнее диагностика.

Последовательность морфологических изменений

Рак в своем развитии проходит несколько стадий, поэтому врач-гистолог при проведении микроскопического исследования может увидеть разнообразные картины опухолевого роста – от предраковых изменений до выявления признаков распада злокачественного узла. Верификация опухоли – это обнаружение при исследовании одного из вариантов типичной последовательности онкологических изменений в тканях:

Временные промежутки между этапами формирования опухоли относительны – иногда проходят десятилетия от первичных доброкачественных процессов к инвазии, в худших случаях от дисплазии к раку – за месяцы.

Врач-гистолог по срезам тканей поставит морфологический диагноз

Верификация опухоли: методы морфологии

Стандартный вариант проведения гистологического исследования – приготовление тончайших срезов биопсийных тканей с последующей микроскопией материала. Эта методика позволяет получить массу полезной информации о клеточно-тканевом составе опухоли. Кроме этого, верификация опухоли – это следующие диагностические методы:

Вне зависимости от методики, основная цель гистологического исследования – определение типа опухоли и оценка клеточных изменений: зная состав наступающей армии, можно выбрать тактику защиты или принять решение о контрнаступлении.

Влияние лечебных факторов на опухоль

Далеко не всегда с момента начала комбинированной терапии можно получить желаемый положительный результат. Ни хирургическая операция, ни химиотерапия, ни курсы облучения не гарантируют полного излечения, что объясняется способностью опухоли приспосабливаться и видоизменяться. Значительная часть вражеского войска погибнет, но те бойцы, которые смогли выжить, дадут новые генерации солдат, способных противостоять лечебным воздействиям. Лекарственные препараты и облучение способны разрушить опухолевую ткань, что приведет к некрозу и воспалению, но даже единичный метастаз, сохранившийся в лимфоузле, может стать основой для рецидива опухоли. Это вовсе не означает, что рак непобедим: зная, что враг коварен и хитер, нельзя расслабляться и успокаиваться после локальной победы. Длительное наблюдение у врача, поддержка противоопухолевого иммунитета и регулярные контрольные обследования помогут избавиться от болезни.

Источник