липидные наночастицы что такое
Липидные наночастицы нашли применение в генной терапии
Ученые из Университета штата Огайо создали наночастицы на основе липидов, которые смогут доставить в клетки генетический материал, чтобы бороться с болезнями, связанными с мутациями.
Эффективная и безопасная доставка в организм «терапевтических генов» — одна из важнейших проблем в развитии генной терапии. Чаще всего для этого используются специальным образом сконструированные вирусы. В новой работе авторы применили наночастицы на основе липидов, в которые были «упакованы» молекулы матричной (информационной) РНК — генетические инструкции по синтезу белков.
В организме информационная РНК строится на основе гена, а затем доставляется из ядра клетки в цитоплазму, где попадает в рибосому — клеточный орган, в котором синтезируется белок на основе записанной в РНК инструкции. Но при генетических заболеваниях мутации в генах приводят к ошибкам в инструкции, поэтому рибосомы или вовсе не могут построить молекулу нужного белка, или создают дефектные молекулы, которые не в состоянии выполнять свои функции. В такой ситуации выходом может стать введение в клетку готовых молекул информационной РНК с правильными инструкциями.
В одном из экспериментов использовались генетически модифицированные мыши с гемофилией. Наночастицы должны были доставить им информационную РНК, связанную с белком, которые называется фактор свертывания крови VIII. Именно с недостатком этого белка связана наиболее частая гемофилия А (около 80 % всех случаев гемофилии). Эксперимент показал, что в течение 12 часов после введения терапевтических наночастиц в организме мышей вырабатывалось достаточное количество фактора свертывания VIII, чтобы обеспечить 90 % его нормальной активности. Второй эксперимент был связан с геном PCSK9, который экспрессируется в печени. Известно множество мутаций, аномально повышающих активность этого гена, что вызывает повышение уровня холестерина в крови. В этом случае молекула РНК использовалась в качестве образца для редактирования ДНК, чтобы изменить ген PCSK9, уменьшив его активность.
Исследование опубликовано в журнале Science Advances.
Все за сегодня
Политика
Экономика
Наука
Война и ВПК
Общество
ИноБлоги
Подкасты
Мультимедиа
Наука
Science (США): копятся подозрения, что наночастицы в вакцине «Пфайзер» от covid-19 вызывают редкие аллергические реакции
За тяжелыми аллергическими реакциями минимум у восьми человек, получивших вакцину от covid-19 производства «Пфайзер» (Pfizer) и «БионТек» (BioNTech) за последние две недели, может стоять полиэтиленгликоль (ПЭГ) в упаковке информационной РНК (мРНК) — основного ингредиента вакцины, говорят ученые. Это же вещество содержится в аналогичной вакцине с мРНК от компании «Модерна» (Moderna), которая в пятницу получила разрешение на экстренное использование в США.
Никогда прежде ПЭГ в одобренных вакцинах не использовался, но содержится во многих лекарствах, которые иногда вызывают анафилаксию — потенциально опасную для жизни реакцию, сопровождающуюся сыпью, резким падением артериального давления, одышкой и учащенным сердцебиением. Некоторые аллергологи и иммунологи считают, что небольшое количество людей, ранее подвергшихся воздействию ПЭГ, может иметь высокий уровень антител, из-за чего возникает риск анафилактического шока на вакцину.
Другие настроены скептически. Однако Национальный институт аллергии и инфекционных заболеваний США (NIAID) настолько забеспокоился, что на прошлой неделе провел ряд встреч, чтобы обсудить аллергические реакции с представителями «Пфайзер» и «Модерны», независимыми учеными и врачами, а также Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA).
Еще NIAID проводит в сотрудничестве с FDA исследование, где анализирует реакцию на вакцину у людей с высоким уровнем антител к ПЭГ или ранее испытывавших тяжелые аллергические реакции на другие лекарства или вакцины. «Пока мы не удостоверимся, что дело действительно в ПЭГ, надо быть осторожнее и не вести себя так, словно это вопрос решенный», — говорит глава отделения аллергии, астмы и биологии дыхательных путей в NIAID Алкис Тогиас (Alkis Togias).
«Пфайзер» заявляет, что «активно проводит дополнительные исследования». В электронном письме нашему журналу отмечается, что компания уже выпустила рекомендации «о доступности соответствующего лечения и дальнейшего наблюдения» на случай, если у пациента после вакцинации разовьется анафилаксия.
Анафилактические реакции могут возникать от любой вакцины, но обычно крайне редки — примерно одна на 1 миллион доз. По состоянию на 19 декабря в США зарегистрировано шесть случаев анафилаксии среди 272 001 человек, получивших вакцину от covid-19, сообщил Томас Кларк (Thomas Clark) из Центра по контролю и профилактике заболеваний США (CDC). В Великобритании зарегистрировано всего два случая. Поскольку вакцины мРНК «Пфайзер» и «Модерны» используют новую платформу, эти реакции требуют тщательного изучения, считает исследователь лекарственной гиперчувствительности из Медицинского центра Университета Вандербильта Элизабет Филлипс (Elizabeth Phillips), которая присутствовала на встрече NIAID 16 декабря. «Это что-то новое», — говорит она.
Новости об аллергических реакциях уже насторожили общественность. «Американские пациенты с тяжелой аллергией нервничают из-за риска, что не смогут пройти вакцинацию, по крайней мере, не этими двумя вакцинами», — написал Тогиас в своем приглашении участникам встречи. «Аллергия в целом настолько распространена среди населения, что это может спровоцировать устойчивость к вакцинам», — добавляет иммунолог из Университета Земмельвейса в Будапеште Янош Себени (Janos Szebeni), который давно изучает реакции гиперчувствительности на ПЭГ и тоже присутствовал на встрече 16 декабря.
Но даже ученые, которые считают виновником ПЭГ, уверены, что вакцинация должна продолжаться. «Вакцинацию пройти нужно, — говорит Филлипс. — Надо попытаться как-то ограничить пандемию». Но срочно необходимы дополнительные данные, добавляет она: «Ближайшие пару недель в США будут иметь решающее значение для дальнейшего развития ситуации».
Зубная паста и шампунь
Клинические испытания вакцин «Пфайзер» и «Модерна» с участием десятков тысяч человек серьезных побочных эффектов не выявили. Но ни в одном из исследований не участвовали пациенты с аллергией на компоненты вакцины. Компания «Пфайзер» исключила тех, кто ранее тяжело переносил любые вакцины. Люди с аллергическими реакциями на пищу или лекарства не исключались, но, возможно, были недостаточно представлены.
Контекст
Bloomberg: есть вопросы по безопасности вакцины «Пфайзер»
Science: вакцины Pfizer и BioNTech — результаты обнадеживают?
WSJ: Pfizer сорвала план по поставкам вакцины
BBC: совместные испытания оксфордской вакцины и «Спутника V»
ПЭГ десятилетиями используются в повседневных продуктах — таких, как зубная паста и шампунь, — в качестве загустителей, растворителей, смягчителей и носителей влаги, а также в качестве слабительного средства. ПЭГилированные соединения все чаще входят в состав биофармацевтических препаратов.
Долгое время считалось, что ПЭГ биологически инертны, но все больше данных свидетельствует о том, что это не так. Согласно исследованию 2016 года Сэмюэля Лая (Samuel Lai), инженера-фармацевта из Университета Северной Каролины в Чапел-Хилле, у 72% людей имеются хотя бы некоторые антитела к ПЭГ — предположительно в результате воздействия косметических и фармацевтических препаратов. Он обнаружил, что порядка 7% имеют достаточно высокий уровень, чтобы обеспечить предрасположенность к анафилактическим реакциям. Антитела к ПЭГ выявляли и другие исследования — пусть и на более низком уровне.
«В результате некоторые компании отказались от продуктов, содержащих полиэтиленгликоль», — говорит Лай. При этом он отмечает, что показатели безопасности целого ряда «ПЭГилированных» препаратов убедили многих, что «опасения насчет антител к ПЭГ преувеличены».
Себени говорит, что механизм анафилаксии из-за ПЭГ относительно неизвестен, потому что в нем не участвует иммуноглобулин Е (IgE) — тип антител, который вызывает классические аллергические реакции. (Вот почему он предпочитает называть эти реакции «анафилактоидными»). Вместо этого ПЭГ запускает два других класса антител — иммуноглобулин M (IgM) и иммуноглобулин G (IgG), которые задействованы в ветви врожденного иммунитета организма, которая называется системой комплемента. Себени изучал ее на протяжении нескольких десятилетий на свиньях.
В 1999 году, будучи сотрудником Армейского научно-исследовательского института имени Уолтера Рида, Себени описал новый тип лекарственной реакции, которую назвал псевдоаллергией, связанной с активацией комплемента (CARPA) — это неспецифический иммунный ответ на лекарства на основе наночастиц, нередко ПЭГилированные, которые ошибочно распознаются иммунной системой как вирусы.
Себени считает, что CARPA объясняет серьезные анафилактоидные реакции, которые, как известно, иногда вызывают некоторые ПЭГилированные препараты, в том числе лидер рынка противораковых препаратов «Доксил». Команда Брюса Салленджера (Bruce Sullenger), хирурга из Университета Дьюка, столкнулась с аналогичными проблемами на испытаниях экспериментального антикоагулянта, содержащего ПЭГилированную РНК. В 2014 году группе пришлось прекратить испытания третьей стадии после того, как у 0,6% из 1 600 подопытных развились серьезные аллергические реакции, а один участник умер. «Это остановило испытания», — говорит Салленджер. Команда обнаружила, что у всех, у кого развилась анафилаксия, оказался высокий уровень антител IgG. Но у некоторых высокий уровень наблюдался безо всяких побочных реакций, добавляет Салленджер. «Получается, что одних антител недостаточно».
На встрече в Национальном институте аллергии и инфекционных заболеваний США некоторые участники подчеркнули, что ПЭГилированные наночастицы могут вызывать осложнения через механизм, отличный от CARPA. Буквально в прошлом месяце Филлипс и ученые из FDA и других учреждений опубликовали статью, где показывается, что пациенты, перенесшие анафилактическую реакцию на ПЭГилированные препараты, имели антитела IgE к ПЭГ. Предполагается, что в механизме участвуют они, а не IgG и IgM.
Другие ученые сомневаются, что ПЭГ вообще имеют к этому отношение. «Что касается рисков CARPA из-за ПЭГ, есть множество преувеличений», — говорит исследователь наномедицины из Университета Ньюкасла Моэин Могими (Moein Moghimi). Он подозревает, что реакции вызывают более традиционные механизмы. «Технически вы доставляете адъювант по месту инъекции, чтобы возбудить местную иммунную систему. Бывает, что некоторые слишком волнуются, потому что у них относительно много местных иммунных клеток».
Другие отмечают, что количество ПЭГ в мРНК-вакцинах на несколько порядков ниже, чем в большинстве препаратов, содержащих ПЭГ. И если эти лекарства как правило вводятся внутривенно, то две вакцины от сovid-19 вводятся внутримышечно, а это приводит к замедленному воздействию и гораздо более низкому уровню ПЭГ в крови, где находится большинство антител к ПЭГ.
Тем не менее компании вполне сознают риски. Еще в проспекте для фондового рынка от 6 декабря 2018 года «Модерна» признала возможность «реакции на ПЭГ со стороны некоторых липидов или связанных с ПЭГ ЛНЧ». А в сентябрьской статье исследователи «БионТек» предложили альтернативу ПЭГ для терапевтической доставки мРНК, отметив: «ПЭГилирование наночастиц чревато существенными недостатками с точки зрения активности и безопасности».
Старший вице-президент «БионТек» Каталин Карико (Katalin Karikó), соавтор технологии мРНК, лежащей в основе обеих вакцин, говорит, что обсуждала с Себени, может ли источником проблем с вакциной быть ПЭГ. (Они хорошо знакомы: оба — венгры, и в 1980-х годах Карико в своей лаборатории учила Себени, как делать липосомы). Учитывая низкое количество липидов и внутримышечное введение, они сочли риск незначительным.
Судя по тому, что нам известно, риск по-прежнему невелик, подчеркивает Карико. «Все вакцины таят в себе определенный риск. Но польза все же перевешивает», — говорит она.
Себени согласен, но надеется, что в долгосрочной перспективе это подтвердится. Он отмечает, что обе вакцины против мРНК состоят из двух инъекций. Его беспокоит, что антитела к ПЭГ, вызванные первой инъекцией, могут увеличить риск аллергической реакции на вторую — либо иные ПЭГилированные препараты.
Задержаться на полчаса
По словам Филлипс, чтобы понять риск, необходимо раскрыть механизмы, лежащие в основе иммунных реакций, и выяснить, как часто они возникают. Все выявленные случаи в США тщательно изучаются, но ключи к разгадке, возможно, уже исчезли: после анафилактических реакции в крови остаются биомаркеры, которые распадаются в течение нескольких часов. На встрече NIAID участники обсудили, как добиться того, чтобы у будущих пациентов анализ крови на эти маркеры брали немедленно.
Если окажется, что причина действительно кроется в ПЭГ, вопрос в том, что можно с этим сделать? Проверить миллионы людей на наличие антител к ПЭГ до вакцинации невозможно. Вместо этого в руководстве Центра по контролю и профилактике заболеваний США рекомендуется не вводить вакцины «Пфайзер» или «Модерна» пациентам, у кого в анамнезе имеется тяжелая аллергическая реакция на какой-либо из их компонентов. Центр предупреждает, что тем, кто тяжело переносит другие вакцины или инъекционные лекарства, следует тщательно взвесить риски и преимущества вакцинации. И еще людям с высоким риском анафилактической реакции следует задержаться в клинике, где проводится вакцинация, минимум на полчаса, чтобы при необходимости получить оперативную помощь.
«По крайней мере, анафилаксия быстро происходит, — говорит Филипс. — Ее можно распознать на ранней стадии и принять своевременные меры».
Йоп де Фризе — медицинский журналист из Амстердама
Материалы ИноСМИ содержат оценки исключительно зарубежных СМИ и не отражают позицию редакции ИноСМИ.
Токсичность липидных наночастиц, применяемых в вакцинах от COVID-19
Поэтому обсуждаемое некоторыми как бы врачами-опозиционерами «перепрограммирование» генома мРНК-вакцинами с целью отложенного ухудшения здоровья выглядит явным оверхедом для мошенников. Да и уровень научки, откровенно говоря, не таков, чтобы поверить, что эти чего-то подобное способны изобрести.
Возможным ключом к разгадке нового способа отравления населения, который будет апробирован в ближайшее время группой Фаучи, является проталкиваемая пропагандонами идейка о регулярной вакцинации (раз в 3-4 месяца) официально не проверенными препаратами при подтвержденной токсичности одного из базовых компонентов многих свежеиспеченных вакцин — липидных наночастиц.
Вот что пишет пропагандон про новые тренды в регулировании деятельности вакцинаторов:
«Перенастройка» вакцин на мутантные варианты «вызывающие озабоченность»
Об этом объявили все разработчики вакцин против COVID-19, разрешённых западными регуляторами и получивших предварительно одобрение ВОЗ (Emergency Use Listing – EUL). Технически провести подобную перенастройку относительно легко и это можно сделать быстро, особенно в случае мРНК вакцин. Основная проблема в другом. Дело в том, что если действовать в рамках «законов мирного времени», то любое изменение в составе вакцины и, тем более изменение её специфического антигенного компонента, обнуляет все предыдущие клинические испытания и всё надо начинать заново. Очевидно, что для нынешней ситуации, такие правила не подходят. До какой степени позволительно «срезать углы» при клинических испытаниях «перенастроенных» вакцин, должны решить фармрегуляторы. FDA на эту тему уже высказалось (https://www.fda.gov/news-events/press-announcements/coronavirus-covid-19-update-fda-issues-policies-guide-medical-product-developers-addressing-virus). Суть, если коротко, для «перенастроенных вакцин» для получения EUA достаточно будет подтвердить безопасность и иммуногенность. Иными словами, повтор полноценной Фазы 3 будет не нужен.
А вот что пишут про токсичность липидных наночастиц, которые как бы доставляют эту мРНК в клетки:
. Несмотря на широкую применимость липидных наночастиц, токсичность этих систем до сих пор недостаточно изучена. Обычно считается, что липиды биосовместимы. Однако известно, что материалы, структурированные в наноразмерном масштабе, могут изменять свои внутренние физико-химические свойства. Таким образом, целью данного исследования была оценка цитотоксичности этих трех систем наночастиц. С этой целью были проведены исследования токсичности in vitro и in vivo. Наши результаты показывают, что наночастицы, содержащие твердые липидные ГМС (SLN и NLC), индуцировали сильную цитотоксичность in vitro [Пфайзер и Модерна используют именно SLN], но проявляли минимальную токсичность in vivo, о чем свидетельствует анализ массы тела [они дальше сами себе противоречат, да и анализ массы — это странный способ изучения цитотоксичности]. Напротив, SLN и NLC возможно индуцируют воспалительный процесс in vivo. Все системы наночастиц индуцировали перекисное окисление липидов в печени животных, но только SLN и NLC индуцировали снижение антиоксидантной защиты, что указывает на то, что основным механизмом токсичности является индукция окислительного стресса в печени. Более высокая токсичность, индуцируемая SLN и NLC, указывает на то, что твердые липидные ГМС могут быть ответственны за этот эффект.
Создан новый тип липидных наночастиц для доставки веществ в мозг
Американские ученые сообщили о создании нового типа липидных наночастиц для доставки в головной мозг веществ, вводимых в организм внутривенно. Они предложили включать в состав наночастиц искусственные липидные производные нейромедиаторов, благодаря чему частицы приобретают способность проходить через гематоэнцефалический барьер.
Флуоресценция GFP-Cre, доставленного в мозг с помощью NT-липидоидов, в срезах мозга мыши.
Доставка в мозг препаратов, предназначенных для лечения нейродегенеративных болезней, злокачественных опухолей, инфекций и инсультов, сильно осложняется тем обстоятельством, что многие из них при внутривенном введении не попадают в мозг из-за гематоэнцефалического барьера (ГЭБ). В статье, вышедшей в Science Advances, предлагается новая система доставки веществ в мозг с помощью липидных наночастиц, в которые были вставлены синтетические липиды, созданные на основе нейромедиатора триптамина. Авторы работы назвали их NT-липидоидами (NT — от англ. Neurotransmitter). Благодаря NT-липидоидам наночастицы, сами по себе не способные к пересечению ГЭБ, могут эффективно проникать через него и доставлять свой груз в мозг.
Исследователи продемонстрировали возможности нового инструмента, доставив различные вещества в мозг мыши: гидрофобный флуоресцентный краситель, малые молекулы препарата амфотерицина B, биомакромолекулы — антисмысловые олигонуклеотиды и молекулы рекомбиназы Cre, сшитой с зелёным флуоресцентным белком (GFP).
Амфотерицин B является мощным противогрибковым средством, и авторы работы ранее уже детально изучили его фармакокинетику в составе липидных наночастиц. Однако в предыдущем исследовании амфотерицин B не попадал в мозг из-за ГЭБ.
Антисмысловой олигонуклеотид, успешно доставленный в мозг, был предназначен для нокдауна гена, кодирующего тау-белок, который задействован в развитии болезни Альцгеймера. Так как после внутривенного введения олигонуклеотида уровень мРНК тау-белка в нейронах головного мозга действительно снизился, новая платформа доставки не только обеспечила беспрепятственный проход молекул в мозг, но и позволила им проникнуть в клетки, сохранив свою функциональность.
Рекомбиназа Cre является одним из инструментов редактирования генов и вырезает последовательность, расположенную между двумя сайтами lox. Авторы работы продемонстрировали эффективность доставки функциональной рекомбиназы Cre в мозг с помощью новой платформы на примере мышей линии Ai14, которые несут искусственную вставку в геноме, окруженную сайтами lox. Как и в случае с олигонуклеотидом, липидные частицы с NT-липидоидами не только успешно доставляют фермент в мозг, но и обеспечивают его проникновение в клетки с сохранением функциональности.
Авторы работы показали, что липидные наночастицы с NT-липидоидами являются эффективными инструментами для доставки в головной мозг не только низкомолекулярных соединений, для которых ГЭБ непроницаем, но и инструментов для нокдауна генов и геномного редактирования посредством рекомбинации. Исследователи утверждают, что новая платформа может найти применение как в лечении разнообразных заболеваний нервной системы, так и в исследовательских задачах.
Схема доставки веществ в мозг с помощью NT-липидоидов (1), формулы и схема синтеза NT-липидоидов (2) и результаты доставки метки в мозг с помощью различных конструкций NT-липидоидов (3).
Вакцина от Covid доставляет Наночастицы для контроля над разумом человека
Это никогда не было «вакциной» против вируса.
Это секретный нанотехнологический проект, разработан для того, чтобы захватить и контролировать мозг человеческой популяции.
Биолог Рикардо Дельгадо и врач, доктор Хосе Луис Севильяно, ведущие онлайн-программы под названием «La Quinta Columna» говорят, что руки некоторых людей становятся магнитными именно в том месте, где им сделали прививку. В этих местах прилипают не только магниты, но и ножницы, металлические детали, инструменты, даже мобильные телефоны!
Это явление не является исключительным для руки. В течение нескольких дней оно перемещается в сторону груди, шеи или верхней части позвоночника.
Они начали свои собственные исследования и обнаружили следующее:
1. Все вакцины производятся с использованием одной и той же нанотехнологии. В Испании его даже описывали как «секретные наночастицы». Эти наночастицы становятся магнитными, когда они достигают той же температуры, что и человеческое тело. Когда они остаются в среде с температурой ниже нуля градусов, они остаются немагнитными. [Почему они замораживают вакцины?]
2. Эти частицы должны быть нанотехнологичным материалом, называемым ГРАФЕНОМ. который является сверхпроводящим и высокоинтегрированным с нейронами клеток головного мозга: Ссылка
3. Европейский союз инвестировал один миллиард евро в проект под названием Флагман графена: Ссылка
4. Частицы ГРАФЕНА могут взаимодействовать с нейронами мозга в удаленном режиме, используя различные радиочастоты (5G могут быть одним из них), они могут отображать мозг и передавать и получать ИНСТРУКЦИИ удаленно: Ссылка
5. Это никогда не были «вакцины» против вируса, вместо этого все время это был секретный нанотехнологический проект, разработанный для достижения и контроля мозга человеческой популяции (до сих пор мы не знаем, могут ли они модифицировать ДНК с помощью 5G). В la Quinta Columna они обнаружили, что люди уже были намагничены с помощью графена присутствующего в масках, ПЦР-тестах, химтрэйлах и вакцинах против гриппа и covid
7. ГРАФЕН может естественным образом выводиться из организма, потому что существует фермент, называемый миелопероксидазой который, по-видимому, расщепляет молекулы графена. Удивительно, но потребление алкоголя или даже табака может помочь увеличить этот фермент. Вот почему они хотят, чтобы население вакцинировалось каждые 6-12 месяцев и было трезвым.
8. Взаимодействие между ГРАФЕНОМ у привитых людей и 5G может привести к летальному исходу, когда 5G будет полностью активирован в 2021, поэтому нам хотелось бы за короткий промежуток времени остановить это безумие и отменить программы вакцинации раз и навсегда.
9. Спикеры Graphene Flagship учитывают указания AstraZeneca, они находятся в очень тесном контакте с крупными фармацевтическими компаниями: «Университет Манчестера представит обзор графена и его использования в биомедицинских устройствах, а представители AstraZeneca, Glaxo Smith Kline, Pixtium Vision, Clinatec и Multichannel Systems расскажут о том, как завершаются эти передовые исследования в отрасли и о пути их продвижения». Ссылка
10. Компания Nanografi, базирующаяся в Турции, производит новую назальную версию вакцины covid для распыления непосредственно в нос (легко проникает в мозг). Они также участвуют в нанотехнологиях использующих графен.
11. ЕС инвестирует 2000 миллионов евро в исследования графена и восстановление человеческого мозга, Испания-страна с большим количеством рабочих групп.
12. Б. Гейтс профинансировал Имперский колледж Лондона на исследования о графене в технологии вакцин на сумму 4,5 миллиона фунтов стерлингов.
13. Майкл Л. Гордон, специалист по национальной безопасности из Wall Street Journal, который публично осудил «оружие массового поражения» (т.н. «белый порошок в пробирке») в Ираке, был тем же журналистом, который рассказал историю о китайском происхождении нового коронавируса в Ухане. «